最新公告 通知:8月16日至8月21日编辑部无人值守,有事可给我方发邮件。敬请谅解!

杂志信息

主编:张选群,马建忠

执行副主编:张力

常务副主任兼责任编辑:徐光
外联部主任:张赛
编辑出版:《数理医药学杂志》编辑部
网址:http://www.slyyx.com
邮箱:slyyzz@126.com(投稿邮箱)
电话:027-87210457
地址:武汉大学医学院,430071

近期优秀文章

CD8+CD28-T细胞在胃癌并转移患者的表达及手术切除对其影响探讨

发布时间:2016-8-4      来源:admin      阅读次数:492

梁永圣

(阳江市中医医院 普通外科,广东 阳江,529500)

摘要:目的:探讨CD8+CD28-T细胞在胃癌并转移患者的表达及手术切除对其影响。方法:纳入58例胃癌患者,采用流式细胞术检测外周血CD8+CD28-T细胞及其细胞因子白介素10(IL-10)及转化生长因子β1(TGF-β1)含量,以及CA72-4含量。术后12周,复诊比较上述指标变化。随访3年, 比较转移组(n=30)及未转移组(n=28)的3年生存率,并分析相关性。结果:(1)与健康对照组比较,胃癌组患者CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)术前,转移组与未转移组的CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均无统计学差异。术后,未转移组CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均显著低于术前,且均显著低于转移组(P<0.05)。转移组CD8+CD28-T细胞、IL-10及CA72-4均显著低于术前,而TGF-β1与术前无统计学差异。转移组术后3年内生存率显著低于未转移组。(3)CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1三者当中任意一者,均与CA72-4呈显著正相关性,而与生存率呈显著负相关性。结论:CD8+CD28-T细胞、IL-10及TGF-β1显著升高是胃癌并转移患者的重要免疫表现,三者与肿瘤标记物及生存率密切相关。

关键词:胃癌;转移;CD8+CD28-T细胞;肿瘤标记物;生存率

 

Expression and significance of CD8+CD28-T cells for patients with gastric carcinoma who underwent gastric excision

Yongsheng Liang

(Department of general surgery, TCM-Hospital of Yangjiang,

Yangjiang 529500, Guangdong, China)

Abstract: Objective: To investigate the expression and significance of CD8+CD28-T cells for patients with gastric carcinoma who underwent gastric excision. Methods: In 58 patients with gastric cancer, using flow cytometry test peripheral blood CD8 + CD28 - T cells and cytokine interleukin 10 (IL - 10), and transforming growth factor beta 1 (TGF - beta 1) content, and the content of CA72 4.Compare the above indicators on 12 weeks postoperatively, appointment changes.Follow-up of 3 years, more transfer group (n = 30) and transfer (n = 28) 3 years survival rate, and correlation analysis. Results: (1) compared with healthy controls, CD8 + CD28 - T cells in patients with gastric cancer group, IL - 10, TGF - beta 1 and CA72 4 were significantly elevated, differences were statistically significant (P < 0.05).(2) the preoperative, transfer and transfer group of CD8 + CD28 - T cells, IL - 10, TGF - beta 1 and CA72 4 had no statistical difference.After surgery, transfer group of CD8 + CD28 - T cells, IL - 10, TGF - beta 1 and CA72 4 were significantly lower than before, and were significantly lower than metastasis group (P < 0.05).Transfer of CD8 + CD28 - T cells, IL - 10 and CA72 4 were significantly lower than before, and TGF - beta 1 and preoperative no statistical difference.Transfer group after 3 year survival rate was significantly lower than transfer.(3) CD8 + CD28 - T cells, IL - 10, TGF - beta 1 either one of the three, and CA72 4 show significant positive correlation, and was significantly negative correlation with survival. Conclusion: CD8 + CD28 - T cells, IL - 10 and TGF - a significant rise in beta 1 is an important immune performance of patients with gastric cancer and metastasis, and tumor markers and survival closely related.
Key words: cancer of the stomach;Transfer;CD8 + CD28 - T cells;Tumor markers;Survival rates

 

 

已有研究发现调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)在肿瘤患者表达含量增加[1]。Tregs主要包括CD4+CD25+T细胞及CD8+CD28-T细胞两大类,其中前者已被研究得较透彻,并且已经发现胃癌患者外周血CD4+CD25+T细胞表达增多,且手术后该细胞含量下降[2]。相比之下,CD8+CD28-T细胞与肿瘤的关系研究不多,国外有研究发现CD8+CD28-T细胞同样在胃癌患者表达增多[3],但从外科角度看,该细胞增多的临床意义如何,与是否转移、手术方式及预后是否相关?目前尚未有该方面的报道。以此为创新点,笔者观察了30例转移及28例未转移胃癌患者CD8+CD28-T细胞的变化,发现其手术及预后相关,过程如下:

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2008年至2012年1月期间我院收治的胃癌患者作为观察对象。以上患者均经术后病理学确诊为胃癌,其中经腹部增强CT或PET/CT确诊为胃癌转移[4]。排除条件为:合并其他原发性肿瘤,合并自身免疫性疾病,服用激素、免疫抑制剂或生物制剂等[5]。共入选58例,其中男性39例女性19例,年龄63.27±19.35岁。入选56名健康体检者作为标本对照,男性36女性20例,两组的性别构成及年龄均无统计学差异。

1.2 手术方法

以上58例患者均行手术治疗,其中未转移的28例患者采用单纯胃大部分切除术,其中11例采用腹腔镜切除,17例采用开腹手术。30例转移患者包括根治全胃切除12例,根治性/姑息性近端胃大部分切除术8例,根治性/姑息性远端胃大部分切除术5例,胃/空肠造瘘术3例,大部分/全胃切除联合脏器切除2例[6]。合并转移患者术后行化疗。术后共随访3年。

1.3 指标比较

1.3.1流式细胞术检测

清晨采集以上胃癌患者及健康者静脉血约3ml,抗凝后采用Ficoll分离获得外周血单个核细胞,随后应用尼龙毛柱获得T 淋巴细胞。使用D&D公司生产的多色流式细胞仪分别检测CD8+CD28-T细胞的百分含量。使用固定穿透剂对胞内细胞因子IL-10及TGF-β1进行染色,使用双激光光源对两者百分含量进行检测[7]

1.3.2 其他指标

采用放射免疫法检测外周血清CA72-4含量,并比较两组3年末的存活率。

1.4 统计学处理

定量资料采用(±s)表示,采用两独立样本t检验比较两组间的差异,运用配对t检验比较手术前后的指标变化,相关性分析采用Pearson参数法。使用统计软件包SPSS 15.0分析数据,以P<0.05为是差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌患者与健康人的差异

与健康对照组比较,胃癌组患者CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 胃癌患者CD8+CD28-T细胞及其细胞因子与CA72-4含量比较

 

分组

n

CD8+CD28-T细胞(%)

IL-10 (%)

TGF-β1(%)

CA72-4(<6.9 U/mL)

胃癌组

58

5.29±1.95

4.78±1.71

3.62±0.87

23.89±15.26

健康组

56

2.36±0.69

2.04±0.57

1.39±0.46

4.38±2.76

t

 

3.226

3.013

2.625

6.825

P

 

0.012

0.017

0.021

0.001

2.2 手术前后指标比较

术前,转移组与未转移组的CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均无统计学差异。术后,未转移组CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均显著低于术前,且均显著低于转移组(P<0.05)。转移组CD8+CD28-T细胞、IL-10及CA72-4均显著低于术前,而TGF-β1与术前无统计学差异。转移组术后3年内生存率显著低于未转移组(P<0.05)。

表2 转移与未转移组患者CD8+CD28-T细胞、肿瘤标记物含量及生存率差异

 

分组

n

手术前后

CD8+CD28-T细胞(%)

IL-10 (%)

TGF-β1(%)

CA72-4(<6.9 U/mL)

3年生存率(%)

转移组

30

5.48±2.01

4.86±1.79

3.73±0.92

25.28±16.29

53.33%(16/30)

4.37±1.65*

3.97±1.34*

3.16±0.63

13.92±8.83*

未转移组

28

5.23±1.92

4.71±1.65

3.58±0.85

22.81±14.37

85.71%(24/28)#

3.30±1.07*#

2.65±0.83*#

2.57±0.59*#

8.72±4.63*#

与术前比较,*P<0.05;与转移组比较, #P<0.05。

2.3 关联性分析

CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1三者当中任意一者,均与CA72-4呈显著正相关性,而与生存率呈显著负相关性。

表3 CD8+CD28-T细胞及细胞因子与肿瘤标记物及生存时间的差异

 

指标

CD8+CD28-T细胞

 

IL-10

 

TGF-β1

r

P

 

r

P

 

r

P

CA72-4

0.861

0.003

 

0.813

0.009

 

0.784

0.013

生存率

-0.807

0.008

 

-0.791

0.012

 

-0.767

0.016

3 讨论

近年发现免疫功能的异常在肿瘤的发病、预后与转归均扮演重要角色,因此近十余年来肿瘤的免疫研究成为热点。在众多的免疫指标当中,T细胞是被研究最多的一个免疫细胞亚群。调节性T细胞(Tregs) 是以分泌IL-10及TGF-β1从而发挥免疫调节作用的一类特殊T细胞[8],其异质性很强,在不同的疾病发挥不同的正反面角色,因此检测IL-10及TGF-β1有助于了解Tregs的功能。就胃肠道疾病而言,炎症性肠病患者CD4+CD25+T细胞及CD8+CD28-T细胞均表达含量过低;但在乙型肝炎等疾病,Tregs可表现为含量增高[9]。Tregs被认为是肿瘤的双刃剑,其一方面可以发挥免疫抑制作用,从而抑制肿瘤的发生,亦可增强免疫作用从而让肿瘤细胞过快生长,从而对机体产生负面作用。因此,探索Tregs与肿瘤外科的关系,具有重要临床意义。

本研究发现,胃癌组患者CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1均显著高于健康对照组,与金秀国[10]等报道的CD8+T细胞亚群增多具有一致性,初步说明胃癌患者CD8+CD28-Tregs切实较健康人增多。作为具有较高特异性的胃癌肿瘤标记物,本组胃癌患者CA72-4显著高于健康人,初步提示选用CA72-4具有较高的敏感性,可为后续的相关性分析提供依据[11]。术前,转移组与未转移组的CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均无统计学差异,这说明不论是否转移,CD8+CD28-T细胞及其细胞因子均无明显差异,间接说明CD8+CD28-T细胞可能与转移不明显相关。为进一步验证该问题,笔者观察了术后情况,发现术后未转移组CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1及CA72-4均显著低于术前,且均显著低于转移组,这说明在未转移的情况下,手术剔除病灶有助于降低CD8+CD28-T细胞及其细胞因子含量以及肿瘤标记物含量。对于转移组而言,术后CD8+CD28-T细胞、IL-10及CA72-4均显著低于术前,但TGF-β1与术前无统计学差异,这说明一个重要现象:TGF-β1在肿瘤转移过程中可能发挥重要作用,其机制可能是TGF-β1参与肿瘤新生血管的形成,在转移的情况下,尽管已行瘤体剔除,但仍有残余病灶,故其血管可能持续增生[12]

在预后方面,转移组术后3年内生存率显著低于未转移组,其原因是转移导致肿瘤细胞浸润从而导致器官衰竭。为进一步明确免疫细胞与临床的关系,笔者进行了相关性分析,并发现CD8+CD28-T细胞、IL-10、TGF-β1三者与CA72-4呈显著正相关性,提示CD8+CD28-T细胞及其细胞因子含量越高,则其血清肿瘤标记物含量越高;该细胞与生存率呈显著负相关性,说明术后该细胞含量越高,则其存活期越短,生存率越低。

通过本研究笔者认为,CD8+CD28-T细胞、IL-10及TGF-β1显著升高是胃癌并转移患者的重要免疫表现,三者与肿瘤标记物及生存率密切相关,因此在手术前后检测该细胞及其细胞因子,有助于判断预后。

 

参考文献

[1] 代辉,黄强,向毓明,等.胃癌患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与TGF-β1检测的意义[J].中国普通外科杂志,2015,24(4):604-607.

[2] 宋军,邱磊,付海啸,等.胃癌组织中调节性T淋巴细胞浸润与预后的关系[J].中华实验外科杂志,2015,32(1):163-164.

[3] 史学菲,白平,唐承薇,等.胃癌患者手术前后CD4+CD25+调节性T细胞的变化[J].中国普外基础与临床杂志,2011,18(9):942-946.

[4] 李宇,杜培准,王东升,等.淋巴结微转移对胃癌患者术后预后影响的Meta分析[J].中华普通外科杂志,2014,29(10):791-793.

[5] 焦旭光,梁寒,邓靖宇,等.淋巴结转移阴性进展期胃癌术后复发危险因素分析[J].中华普通外科杂志,2013,28(10):732-735.

[6] 倪中凯,姚凯,程川兵,等.远端胃癌患者行D2根治术中第12组淋巴结的清扫[J].中华普通外科杂志,2014,29(6):416-420.

[7] Shen Y, Qu QX, Zhu YB, et al. Analysis of CD8+CD28- T-suppressor cells in gastric cancer patients [J].J Immunoassay Immunochem,2012;33(2):149-155.

[8] Yoshii M, Tanaka H, Ohira M, et al. Expression of Forkhead box P3 in tumour cells causes immunoregulatory function of signet ring cell carcinoma of the stomach [J].Br J Cancer,2012,106(10):1668-1674.

[9] Yang N, Li Z, Jiao Z, et al. A Trichosanthin-derived peptide suppresses type 1 immune responses by TLR2-dependent activation of CD8(+)CD28(-) Tregs [J].Clin Immunol,2014,153(2):277-287.

[10] 金秀国,刘晓光,刘波,等.胃癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28表达的检测及临床意义[J].江西医学检验,2007,25(1):17-18.

[11] 赵连爽,云科,董西华.胃癌患者血清中CA72-4、CEA和CA19-9水平及其与病理特征的相关性[J].中国医科大学学报,2014,43(3):259-262.

[12] 杜晓辉,刘利利,宁宁,等.胃癌患者血清调节性T细胞、细胞毒性T淋巴细胞的检测及意义[J].中华实验外科杂志,2013,30(12):2704-2706.

返回>>Top︿

地址:武汉大学医学院《数理医药学杂志》编辑部 技术支持:武汉云思达信息科技有限公司
邮政编码:430071 联系电话:027-87210457 传 真:(027)87210457
投稿咨询:1209807661杂志合作:1209807661